干细胞国际

目标。为了证明人参皂苷Rg1对人骨髓间充质干细胞（HBM-MSC的）的分化的作用。随后，对于检测皂苷Rg1的合理的机制影响间充质干细胞分化进行了探讨。方法. 流式细胞仪用于细胞鉴定。采用分化培养法研究hBM-MSCs的分化能力。南非-β-gal染色用于检测细胞衰老水平。Western blot和免疫荧光法检测蛋白表达水平。RT-qPCR检测mRNA表达水平。结果。皂苷Rg1调控HBM-MSC分化。分化培养分析表明，皂苷Rg1促进细胞对成骨软骨和。Western blot检测结果表明，皂苷Rg1调控的过度激活β-连环蛋白信号通路与GSK-3磷酸化的调节β. 葛兰素史克-3β抑制剂（氯化锂）显著增加GSK-3的皂苷Rg1诱导的磷酸化β从而降低Rg1诱导的hBM-MSCs分化。结论. 人参皂苷Rg1通过抑制GSK-3的磷酸化作用降低衰老细胞Wnt途径的过度激活β和调节间充质干细胞的分化能力。

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Sox9的是与确定和骨髓的软骨细胞系的维持间充质干细胞（BMSC）的特性的转录因子。在最近的研究中，我们已经证明了软骨碎片聚集体（细胞砖）可促进体内骨髓基质干细胞的软骨。但是，它仍是未知的BMSCs /软骨细胞砖的比率是否对3-d软骨再生和相关分子机制影响显著。To address this issue, the current study subcutaneously injected three groups of cell complex with different rabbit BMSCs/chondrocyte bricks’ ratios (1 : 2, 1 : 1, and 2 : 1) into nude mice. Gross morphology observation, histological and immunohistochemical assays, biochemical analysis, gene expression analysis, and western blot were used to compare the influence of different BMSCs/chondrocyte bricks’ ratios on the properties of tissue-engineered cartilage and explore the related molecular mechanism. The constructs of 1 : 1 BMSCs/chondrocyte bricks, (B1CB1) group resulted in persistent chondrogenesis with appropriate morphology and adequate central nutritional perfusion without ossification. The related mechanism is that increased expression of Sox9 in the B1C1 group promoted chondrogenesis and inhibited the osteogenesis of BMSCs through upregulating Col-II as well as downregulating RUNX2 and downstream of Col-X and Col-I by upregulating Nkx3.2. This study demonstrated that BMSCs/chondrocyte bricks 1:1 should be a suitable ratio and the Sox9-Nkx3.2-RUNX2 pathway was a related mechanism which played an important role in the niche for stable chondrogenesis of BMSCs constructed by chondrocyte bricks and PRP.

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腹膜纤维化（PF）表示腹膜透析（PD）的长期并发症，影响腹膜（PM）功能。脂肪组织来源的间质干细胞（ASC）显示免疫调节作用，并且可以代表一个策略，以阻止PF。这项研究的目的是分析在尿毒症大鼠开发的实验模型PF ASC的效果。以模仿患者长期PD，组合模型，其特点是PF和慢性肾脏病（CKD）的结合临床情况，Wistar大鼠被开发。大鼠用0.75％含腺嘌呤饲料喂养，30天，以诱导CKD尿毒症。PF用葡萄糖酸氯己定（CG）从第15天至30的腹膜内注射诱导。 第15天和第21天静脉注射ASC。大鼠分为5组：对照组，正常大鼠；CKD，腺嘌呤饮食大鼠；PF，CG饮食大鼠；CKD+PF，PF饮食大鼠；CKD+PF+ASC，PF饮食尿毒症大鼠。用Masson三色染色法测定PF。通过免疫组化、多重分析和qPCR评估炎症和纤维化相关因素。与对照组和CKD组相比，PF组和CKD+PF组的PM厚度和炎症明显增加。ASC治疗可阻断PF的发展。此外，促生长因子（TGF）的上调-βASC可显著改善CKD+PF组大鼠肌成纤维细胞的表达。除抗纤维化作用外，ASC还具有抗炎作用，可避免白细胞浸润和炎性细胞因子（IL-1）的过度表达β，TNF-α和IL-6）在由GC引起的PM。ASC可以有效预防PF的发展CKD + PF的实验模型，可能是由于它们的免疫调节特性。这些结果表明，ASC可代表用于治疗长期PD相关纤维化的潜在策略。

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脂肪衍生的基质血管级分（SVF）为自体细胞移植的有效源。然而，SVFs的质量和数量取决于患者的年龄，并发症等因素的影响。在这项研究中，我们开发了可重复增加细胞数量和通过外科手术，这是我们长期改善脂肪来源SVFs质量的方法“创伤修复启动。”从BALB / c小鼠的腹股沟区皮下脂肪通过切碎脂肪实质（损伤）和结扎皮下脂肪馈送动脉（缺血）用外科手术处理（底漆）。SVFs被灌注程序后，分离出在第0天，1，3，5，或7。涂底漆SVFs的基因表达水平通过测定其差异表达的基因进行微阵列和途径的分析测量。通过流式细胞术在致敏SVFs的细胞组合物的变化进行了分析。SVFs移植到同源缺血后肢来衡量他们的血管生成和再生的潜力。后肢血流量用激光多普勒血流灌注成像仪测量，并且毛细管密度通过CD31缺血组织的染色定量。HIF-1α和VEGF-A的合成在SVFs的稳定化，通过荧光免疫染色和Western印迹法分别测定。 As a result, the number of SVFs per fat weight was increased significantly on day 7 after priming. Among the differentially expressed genes were innate immunity-related signals on both days 1 and 3 after priming. In primed SVFs, the CD45-positive blood mononuclear cell fraction decreased, and the CD31-CD45-double negative mesenchymal cell fraction increased on day 7. The F4/80-positive macrophage fraction was increased on days 1 and 7 after priming. There was a serial decrease in the mesenchymal-gated CD34-positive adipose progenitor fraction and mesenchymal-gated CD140A-positive/CD9-positive preadipocyte fraction on days 1 and 3. Transplantation of primed SVFs resulted in increased capillary density and augmented blood flow, improving regeneration of the ischemic limbs. HIF-1 alpha was stabilized in the primed cutaneous fat原地吸后的涂底漆的SVFs和VEGF-A的合成是在一峰上5天。因此伤口修复吸导致增加数量和增强血管生成潜力SVFs。

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虽然神经干细胞（NSCs）可以向中枢神经系统（CNS）损伤后损伤迁移，迁移能力总是由于CNS损伤后的密合性的配体的扰动组成和密度和细胞外基质（ECM）梯度的限制。迄今为止，各种方法已经被开发，以提高NSC迁移和许多因素，这些都影响NSC迁移能力，也已确定。这里，初级神经干细胞培养和肌动蛋白的α2（ACTA2）在神经干细胞使用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫测定的表达。接下来，ACTA2在调节NSC迁移和可能的作用机制中的作用进行了探讨。我们的研究结果证明了神经干细胞表示，ACTA2。同时，使用siRNA下调ACTA2通过经由增加的RhoA表达和降低Rac1的表达肌动蛋白丝的聚合阻碍抑制NSC迁移。本研究可以丰富ACTA2的基本知识NSC迁移并打开了一个渠道提高NSC迁移能力，随后提供介入目标中枢神经系统损伤后的功能恢复。

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微空间培养是诱导多能干细胞（iPSCs）自组织化的一种有效途径。然而，用于成骨分化的微球的最佳大小尚不清楚。我们假设一个特定的微空间大小可以促进自组织的iPSC分化形成骨样组织体外. 本研究的目的是探讨微球大小对成骨结构移植后骨再生的影响。分离的小鼠牙龈成纤维细胞来源的iPSCs被镀在超低附着性的微球培养孔中，每个孔含有数百个U形底部微孔点，在生长培养基中形成细胞聚集体。微孔孔径/深度不同（400/560 μ米（Elp400），500/700 μ米（Elp500），和700分之900 μm（Elp900））（库拉雷；Elplasia）。5天后，细胞在成骨诱导培养基中保持35天。只有Elp500条件下的细胞在成骨诱导过程中紧密聚集并保持高活性。经过10天的诱导，Elp500细胞结构显示出明显的高表达RUNX2,成骨相关转录因子抗体,胶原蛋白1A1,骨钙素,骨唾液蛋白和骨桥蛋白相比Elp400和Elp900结构。在亚甲基蓝 - 复冯Kossa染色和Movat的五色染色，仅Elp500构建体显示在第35天健壮类骨质形成，与I型胶原蛋白的高表达（一个主要的类骨质成分）和骨钙蛋白。细胞构建体移植入大鼠颅盖骨缺损，以及相比于Elp900组后的微CT分析3周显示出更好的骨修复与Elp500组显著更高的骨矿物质密度。这些结果表明，微小空间大小会影响iPS细胞的自我组织成骨分化。Elp500微小空间培养特异性诱导小鼠iPSC成富类骨质骨样组织具有高的骨再生能力。

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