摩洛哥高危人员乳清毒症的SEROPREVALING

摘要

背景．钩端螺旋体病是一种人类源于大多数发展中国家遭受的被忽视的传染病遭受的忽视忽视的传染病。2014年2月17日至23日之间进行了横断面研究，以估算Casablanca（摩洛哥）的高危人群的腹腔镜血清逆转录。方法．在3个高风险职业地点共采集490份人血清样本(97.6%为男性)，其中最大的肉类屠宰场(N= 208)那a poultry market (N= 121)，鱼市(N = 161). A total of 125 human blood samples were also collected from the general population and used in this study as a control group. To detect the presence of anti-钩端螺旋体，血清用内部IgG和IgM酶联免疫吸附试验（ELISA）筛选。通过微观凝集技术（MAT）测试阳性样品，使用24个Serovar培养物和切割点为1：25。结果．对照组钩端螺旋体病的血清阳性率为10.4%(13/125)。高危人群的总血清阳性率为24.1%(118/490)，其中抗的血清阳性率为7.3%(36/490)、13.7%(67/490)和3.1% (15/490)钩端螺旋体IgM，IgG和IgG和IgM抗体分别。大多数阳性个体都职业上参与家禽（37.2％），其次是市场鱼（26.1％）和肉屠宰场（14.9％）工人。在所有ELISA阳性血清样品中，20.3％（N = 24) had positive MAT responses, of which the Icterohaemorrhagiae (N = 7) is the most common infecting serogroup followed by Javanica (4), Australis (2), and Sejroe, Mini, and Panama (one in each). In the remaining 8 MAT-positive sera, MAT showed equal titers against more than one serogroup.结论．从事危险活动的个人往往暴露于钩端螺旋体感染。因此，针对这些人群的控制和预防政策是必要的。

1.介绍

睑作血，由属的病原成员引起的钩端螺旋体，是最普遍的细菌人畜共患病[1］．在全球范围内，这种重新出现的疾病可能受到职业条件、城市化和贫困等环境条件的影响[2那3.］．缺乏基本卫生设施、住房条件差以及获得教育和保健的机会有限，增加了城市地区人类感染的风险[4.那5.］．

其在人体中的传播通常通过直接或间接接触与受感染的动物的尿液进行直接接触[6.］．虽然在城市和农村环境中感染可能是普遍的，但这取决于动物接触。环境和社会经济病症也有助于感染。根据世界卫生组织，在人口中，一些高风险群体更有可能接触钩端螺旋体像兽医，渔民，屠夫和家禽和动物农场工人[7.］．造成了千变万化的开始作为一种急性疾病，全身性疾病的症状通常与人类流感混淆。但是，它可以发展成严重的并发症，如急性肾功能衰竭，肺出血和心脏并发症[8.］．

每年估计有五十万例严重钩端螺旋体病是全球报道9.］．然而，尽管该病在全球具有重要意义，但在非洲有关该病的负担和流行病学数据方面仍存在巨大差距[10］．在包括摩洛哥在内的大多数非洲国家，缺乏关于这种疾病的数据可能是由于医生对这种疾病缺乏认识、症状不明确、获得诊断的机会有限以及钩端螺旋体病负担评估研究。

在摩洛哥，自1995年以来，包括钩端螺旋体病在内的强制性须报告的人类传染病的通报制度一直由流行病学和疾病控制方向管理('Epidémiologie和la Lutte contre diseases方向)[11］．钩端螺旋体病的诊断基于IGM-ELISA血清学患者的临床图。为了产生有关钩端螺旋体病的数据，分析了从2005年至2012年期间从临床和实验室结构中收集的常规数据。在此期间报告了305例人类病例，对应于每辆100 0000.1的估计年度发病率。之前/最近在温带国家报告了类似的结果。在这项摩洛哥研究中，在夏季秋季期间观察到季节性增加的病例，在一些省份的常规流行峰（17.0％）。源自卡萨布兰卡地区的报道案件居住在靠近Sidi Moumen和Hay Mohammadi等高风险职业网站的特定区域。2014年，与地方当局合作的流行病学和疾病控制和STERTURUMAROC的方向决定对Casablanca的怀疑地点进行血液化学调查。这项调查的目的是估计血清伪装钩端螺旋体SPP。在各种人类高风险群体中，并确定致病性钩端螺旋体塞洛瓦尔。本研究还旨在产生关于与本病有关的风险因素的信息，以促进公众意识，因为在没有足够的卫生条件的情况下进行了广泛的专业活动。

2.材料和方法

２.１.研究网站

在Casablanca，2014年2月17日至23日进行了一个横断面研究，评估了3个高危职业网站（最大的Abattoir，最大的家禽市场和大港鱼市场）和A中的乳化虫病的Seroprevence一般人群没有暴露于腹腔镜病的风险作为对照组。

２.２.研究人群

在这项研究中，我们注册了来自3个职业高危位点的成人参与者和对照组。签署书面同意后，就完成了参与者的招聘。该研究设计由Casablanca Medical of Morocco Casabranca Medicent大学的伦理委员会提交和批准。该研究按照赫尔辛基宣言的原则进行。参与我们的研究是自愿，匿名，机密的，并且只有研究目的，以保护隐私并确保数据完整性。

２.３.样本量及功率计算

在没有任何关于摩洛哥钩端螺旋体病血清流行率估计数据的情况下，我们首先考虑了一个方便的全球样本，在3个高风险职业场所的约500人，基于80%的功率，5%的I型误差，10%的无应答率，根据已发表的国际研究，预期血清流行率约为12% [12-14］．因此，我们预期我们的样品如下：250名受试者在最大的Abattoir，125个受试者的家禽市场，港口中的125名科目，根据每个网站的员工人数。总人口还提供了125名科目。

２.４.数据收集

问卷是由研究人员设计。访谈是在阿拉伯语进行。It includes information about work-related risk factors including work positions, occupational animal contact, personal protective equipment (e.g., gloves, etc.), and personal data such as age, gender, grade level, type and place of residence, and prior diagnosis of leptospirosis.

2．5．血清学检测

通过静脉穿刺在无菌管中从每个参与者收集5ml血液并保持冷却（5℃）。离心后，收集的血清在-20℃下保持冷冻直至使用。在法国巴黎巴黎的STEPTERURIS的国家参考中心进行乳化鼠血清症。进行酶联免疫吸附测定（ELISA）和微观凝集技术（MAT）测试。IgM和IgG滴度由内部ELISA分开测定，如前所述[15］．工人血清的一个子集，表现出含有抗体钩端螺旋体IgM和/或IgG-ELISA检测，MAT按标准方法检测[15，使用24株活钩端螺旋体作为抗原。滴度为1:25或更高被认为是证据钩端螺旋体SPP。在巴黎的Institut Pasteur的leptospirosis的国家参考实验室之后，由于术语参考实验室的准则，建议的感染。[16］．将阳性样品滴定到最终滴度。如果超过1种血清组具有相同的高滴度，则标记为混合反应或不确定[17］．IgM-和/或IgG-ELISA阳性的患者视为钩端螺旋体病。

2.6。统计数据

数据分析采用Epi Info版本6(美国亚特兰大疾病控制与预防中心)。结果以百分比表示，变量采用卡方(χ²），95％的置信区间，和价值。当概率值等于或小于0.05时，认为具有统计学意义。

结果

目前的作品是横截面研究，包括从Casablanca（摩洛哥）的高风险群体中选择的样品，以估算钩端螺旋体病的Seroprevalence。共有490名工人参加了该研究，包括208名（42.5％）肉屠宰场工人，121名（24.7％）家禽市场工人，161名（32.8％）鱼市工人，并在2014年2月17日至23日之间调查。受试者在19和75岁（平均年龄：45.1岁）。478（97.6％）工人与12名（2.4％）的女性相比是男性;女性比例为39.8：1。由于少数女性参与者，没有性分层风险分析对感染的影响钩端螺旋体SPP。正在进行中。在全球范围内，年龄组“40-60岁”是主要的（58.2％），其次是年龄组“19-39岁”（34.5％）和年龄组“61岁及以上”（7.3％）．通过职业网站，在屠宰场工作者和鱼市工人表中发现了大会“40-60岁”1．大多数工人只达到小学低和他们都没有钩端螺旋体病的诊断之前。他们主要来自卡萨布兰卡和生活特别普遍的邻里为Lamdina lakdima，干草穆罕默迪，穆莱·拉希德，拉拉MERYEM，Lahraouiyine和西迪Moumen，靠近高风险的职业网站。125个科目对照组（总人口）分别为21和68岁（平均年龄42岁）之间。68（54.4％）受试者相比57（45.6％）的女性男性;the male to female ratio was 1.19 : 1. They were all living in the city of Casablanca, with no antecedent of leptospirosis and with a school level from primary to higher education.

总体而言,24.1% (N= 118)， IgG和/或IgM抗体阳性钩端螺旋体抗体阳性率为7.3% (36/490)钩端螺旋体IgM抗体，IgG阳性13.7% (67/490)，IgG和IgM均阳性3.1%(15/490)。家禽市场工作人员的血清阳性率(37.2%)显著高于鱼类市场工作人员(26.1%)和肉类屠宰场工作人员(14.9%)( ）;见表2．按年龄和职业分组的血清阳性样本分布也见表2．关于职业群体，钩端螺旋体IgM Seroprevalence为7.7％（N = 16) in meat slaughterhouse, 8.3% (N = 10) in poultry market, and 6.2% (N = 10) in fish market.钩端螺旋体IgG血清阳性率为5.3% (N= 30)， 21.5% (N= 26)， 18.6% (N = 11) in fish market, poultry market, and meat slaughterhouse, respectively. Seroprevalence of both IgM and IgG was 1.9% (N = 4), 7.4% (N= 9)和1.2% (N= 2)肉类屠宰场、家禽市场和鱼类市场。在3个职业分组中，IgM和/或IgG抗体的血清流行率以40 ~ 60岁工人最高，其次为“19 ~ 39岁”。

51份IgM阳性工人样本(36份IgM阳性，15份IgM/IgG阳性血清)ELISA滴度分布如下:1∶200(74.5%)、1∶400(19.6%)、1∶800(3.9%)、1∶1600(2.0%)。IgM抗体滴度最高的样品仅3份(5.9%)(2份为1:800,1份为1:1600)，其余48份样品滴度最低(1:200 ~ 1:400)。

在82个IgG阳性工人样本（67 IgG阳性和15个IgM / IgG阳性血清）中，阳性级滴度的分布如下：+在29.3％，+++中发现++以14.6％，11.0％的++++。大多数阳性样品血清具有低滴度，分别具有34（42.5％）和24（30.0％）样品，分别具有+和++的阳性标度滴度。IgG抗体滴度从阴性（0）〜++++的规模范围内（0：阴性，+：轻度阳性，++：平均阳性，+++：足够的阳性，++++：高度积极）。

125例正常人群中，6例男性IgM阳性(年龄<40岁)，7例男性IgG阳性(年龄40 - 60岁)。IgM抗体滴度在1:200 (N = (4) and 1 : 400 (N= 2)， IgG在+ (N = 4) and ++ (N= 3)。对照组的血清流行率为10.4%(13/125)，显著低于高危组的总血清流行率24.1%(118/490)。

所有118个ELISA阳性工人样品样品血清被垫子和抗溶细胞间抗体抗体对一个或多个血清素进行测试，仅在24（20.3％）样品中发现。桌子3.显示不同组间的血清流行率(mat阳性)。在肉类屠宰场工人中所占比例最高(29.0%)，其次是家禽街市工人(24.4%)和鱼类街市工人(9.5%)( ）。

13例IgM、IgG阳性的正常人未行MAT检测。

服用1：25的垫滴度为正，血清小组钩端螺旋体根据最高的MAT滴度确定的各职业群体感染的原因，总结在表中4.．

最常见的血清组是icterohaemorrhagiae，其在7（29.1％）中被观察到，其次是爪哇省（16.7％）。澳大利亚在2（8.3％）和Sejroe（Hardo Prajitno），Mini和巴拿马中见过，每一个（4.2％）。在剩余的8个样品血清中，MAT向多于一种血清术（未确定的血清组）表示相同的滴度。也就是说，5种血清阳性血清具有两种凝集素，具有两种凝集性血清小组：在这5个关联中发现的血清组是爪哇（3例），路易斯安那州（3），Canicola（2），迷你（1），Batavia（1）和Javanica（1）。在剩余的3个未确定的血清群中，MAT展示了仅两种血清小组，用Canicola或路易斯安那州和巴拿马的血清群体，与迷你的巴拿马均等。

MAT滴度在这24个样品中的分布情况见表5.．Only one has a titer of 1 : 200, three have titer of 1 : 100, and the remaining twenty had titer in the range of 1 : 25 to 1 : 50.

值得注意的是，在目前的研究中，94份ELISA阳性样本的血清不能被MAT所证实钩端螺旋体SPP。抗体，尤其是6个垫阴性IgM-ELISA阳性样品血清，滴度等于400（2肉屠宰场工人血清，3家禽市场工人血清，1条鱼市工人血清）和11个其他垫子阴性IgG-ELISA- 具有升高的IgG抗体滴度（1名肉屠宰场工作者血清，8家禽市场工人Sera，2条鱼市场工人Sera）的肌滴数（1肉屠宰场工作者血清）（数据未显示）。

4.讨论

钩端螺旋体病是世界上最常见和普遍普遍的动物质感染之一，并被世界卫生组织的被认为是被忽视的疾病[18］．与动物的任何类型的接触都会带来获取瘦身受感染的风险;在大多数情况下，它通过被感染的动物尿液污染的环境获得[6.］．

就我们所知，目前的工作是首次评估血清流行病学钩端螺旋体在摩洛哥的种群中。这种血清流行率是根据ELISA结果确定的。原因很简单，这种方法是很好的建议，一些作者测定血清抗体抗钩端螺旋体SPP。[15那19]更重要的是，随着这项调查的科目显然，有益健康的，摩洛哥不是这种疾病的地方性区域。更重要的是，IgM和IgG抗体在钩端螺旋体病的情况下仍然多年[20.那21］．此外，检测的IgM抗体特定的至钩端螺旋体ELISA法已广泛应用。如果IgM-ELISA检测呈阳性，则无需检测第二份样本，而配对血清检测则需采用MAT检测进行诊断确认[22］．最后，众所周知，当测试早期急性相血清样品而不是配对的标本时，检测抗体的垫子缺乏敏感性和特异性[8.］．MAT灵敏度也遭到了破坏，如果所有本地相关血清变型未示[23］．

在高风险参与者中检测到24.1％的血清额度明显高于对照组的血清透析，并与特立尼达和多巴哥的兽医学生报告的26.5％相媲美[24]印度健康人口24％（24％）[25]分别进行IgG-ELISA和IgG / IgM-ELISA测试。但是，与摩洛哥不同，在印度和特立尼达和多巴哥不同，人类骨干血管病是一种地方病[25那26］．

影响本次调查中工人血清阳性率的一个因素可能是研究人群主要为男性(97.6%)，平均年龄为45.1岁。以往的研究表明，男性在临床病例-患者中的优势是众所周知的[21那27那28]，并被解释为他们更倾向于参与高风险的户外活动[27那29］．同样，工作年龄人口中成年人的发病率也始终是报告的最高的[21那28］．造成这一比率的另一个潜在的重要因素可能是大多数参与者的教育状况。毫无疑问，这些工人的低教育程度可能相当于缺乏有关可避免的可能风险因素的知识钩端螺旋体感染。

在三个职业领域中，与肉类屠宰场参与者相比，在家禽市场工作人员和其次是鱼类市场参与者中检测到的较高的血清阳性率表明，在前两个工作地点的工作是钩端螺旋体感染的一个重要危险因素。这两个工作场所,缺乏卫生条件适用于大量的啮齿动物的生存,并提供他们一个丰富的食物来源,以及狗,猫,和其他城市的水库,比如马和驴,在同一个地方工作中经常遇到的。因此，这些恶劣的工作条件可能是钩端螺旋体生存的适当环境，并使这两个地区成为这些细菌频繁传播的流行病学利基。经常暴露在这种恶劣环境中的工人，卫生条件总是很差，几乎没有人在工作时采取任何保护措施。更重要的是，他们中的一些人手上有伤、伤口或割伤，这又增加了进入的机会钩端螺旋体SPP。[27那30.那31］．对于所有这一切，重复接触同一循环螺旋体导致免疫系统定期产生抗钩端螺旋体抗体并在重新感染的情况下衰减症状[21］．更重要的是，第一次感染可能已作为自然活疫苗赋予无关的交叉保护钩端螺旋体塞洛瓦[21］．因此，参与本研究的受试者可能无钩端螺旋体病症状，尽管他们在血清学上呈阳性。

与前两个区域相比，我们在肉屠宰场中录制了更低的普遍性。普及率的这些差异可能与卫生条件有关。卡萨布兰卡的伟大屠宰场是多才多艺的，现代材料和透明的屠宰电路，符合卫生卫生。然而，与哥伦比亚群体（7％）相比，查找率更高，为在屠宰场工作的人群[32］．

在另一方面，这项工作的结果表明，黄疸出血是第一大群侵染。这MAT结果是一致与来自世界各地的其他许多报道[21那24那33那34］．大约32年前在摩洛哥进行的一项研究显示，这种血清组是最常被诊断出并导致一种严重疾病的群体:三分之一的患者住进了重症监护病房[35］．这一数据表明，至少在20世纪70年代末和80年代初，黄疸出血病是导致摩洛哥人钩端螺旋体病的主要血清组。

然而，我们研究的一些意想不到的观察结果是ELISA和MAT测试之间的SEROPREVALING率的广泛差异。在118个阳性ELISA中，94个样品工人血清是阴性的。逻辑推理可能是其他血清科或血清组，在目前的研究中未测试，对其剩余的ELISA阳性垫阴性样品负责。Bakoss等人释放的数据可能会争论这些作者，这些作者据报道，在不同地理位置中引起髓质病变的血管的数量和类型会影响垫子的血清普促[36］．与MAT相比，对这种广泛差异的第二合理解释是ELISA的高灵敏度和低特异性[24］．Thirdly, the numerous MAT undetermined serogroup with titers 1 : 25 (N= 8)可能提示这些患者以前曾被其他血清感染。最近的一项研究报道，新获得的血清可能与前感染血清发生交叉反应[22］．在这种情况下，对先前的血清素特异的抗体的滴度可以高于针对新感染血清疣的抗体。4倍上升抗体滴度将用作当前感染的指标，并应考虑提供四倍上升抗体滴度或更高的所有血清素[22］．最后，它可能意味着具有低水平抗体（IgG和/或IgM）的血清阳性工人具有除腹部血管症之外的条件，或者它们的免疫系统没有正常响应。

目前研究中使用的诊断程序可以被认为是限制，因为它在单个样品中测试IgM和IgG而不是来自每位患者的配对样本。因此，结果不能推广到整个摩洛哥人群。我们计划执行一个面板，涵盖摩洛哥leptospira菌株，以确定循环的血清小组，并找出垫面板是否涵盖了所有血清小组。

结论

目前的结果表明，钩端螺旋体病是Casablanca职业群体的潜在健康危害。预防职业人体暴露被认为是基本的控制措施。

目前的结果表明，钩端螺旋体病是在卡萨布兰卡的职业群体的潜在健康问题。从事危险活动的个人往往暴露于这种传染病职业人兽共患病。因此，基本控制和预防对这些群体的政策是必要的，主要是建议保持工人和其他人的健康和安全。卫生部门要加强对本病的工人意识，通过宣传采取有关良好的工作做法和指引，其发射方式和注意事项。

数据可用性

在当前研究期间分析的数据集可以从相应的作者获得合理的请求。

的利益冲突

提交人声明有关本文的出版物没有利益冲突。

致谢

作者非常感谢来自国际送货线路德Instituts巴斯德（RIIP）和国家参考中心钩端螺旋体病的技术人员（西尔维Brémont，安妮Landier和法丽达Zinini），巴黎的巴斯德研究所，对血清的血清学分析的支持。这项研究是由法国巴斯德研究所杜摩洛哥支持。

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