这项研究是在南贡德尔地区，西北埃塞俄比亚进行。The Zone is located in the Amhara Region, 660 km north east of Addis Ababa, the Capital of Ethiopia. The Zone is known for its diverse topography ranging from flat and low grazing land to high cold mountains. The altitude of the Zone ranges from 1500 to 3,600 m above sea level. The average yearly rainfall of the Zone ranged from 700 mm to 1300 mm in while the average daily temperature was 17°C in 2017. South Gondar Zone consisted of 10 districts and covers a total area of 14,320 sq km. According to the Central Statistical Agency of Ethiopia, the Zone has a total population of 2,051,738 and a population density of 145.56 [ 9]。该地区的大多数人口(90.47%)是农村居民。统计区内共有468,238户家庭，平均每户4.38人[ 9]。

大多数人口一直依靠自给农业和奶牛饲养[ 10]。该区域已经被著名的土著奶牛如“Fogera”和“德拉”牛。乳业是用小的养殖规模普遍实行。

人类结核病例是从区卫生服务中心，周围卫生站，纬向和地区政府以及私人转诊医院（Debretabor，Felegehiwot和甘比hosptals）随机选取。包括人的情况下，是谁访问了医疗机构寻求结核病治疗的活动性肺结核病人。控制人的对象是谁没有肺结核病例在过去的五年，居住在同对他们的家庭成员结核病例的家庭同村户。双方积极TB家庭和TB阴性家庭拥有的牲畜，牛结核病进行了测试。

小规模的奶农被永久地生活在区前至少两个月的研究中,五岁以上的研究以及他们同意和愿意参加研究包括在内,而那些没有与牛,那些不愿意参与,低于五岁和重病的被排除在参与这项研究。包括患有活动性结核病例的家庭和无结核家庭饲养的当地和6个月以上的杂交牛。小于6个月的幼牛、临床患病牛和产后1个月的牛被排除在研究之外。

的比较的横截面研究2015年12月和2018年二月之间进行用15％牛结核病患病率在TB阳性家庭和TB自由户中的5％牛结核病发病率，95的假设下计算用于该研究的样本大小% confidence interval (CI) with a power of 80%, a ratio of cases to comparison groups of 3 : 1 (based on findings of 15.3% bovine TB among TB positive households and a 5.9% BTB among TB free households) [ 8]。加入10％无应答率，所需的样品尺寸为105 TB阳性家庭和35 TB免费户。然而，在本研究中，由于一些限制，我们只勉强达到了只有63 TB阳性和32 TB的负面户。在此基础上，共476种牛（315从TB阳性家庭和161从TB免费户）对牛结核病进行了测试。

所有人类研究参与者都接受了问卷调查，以评估他们对结核病人畜共患传播的认识和做法，以及可能导致这种疾病的危险因素。询问了他们的社会人口特征、知识、态度和对结核病的做法，包括他们对生奶/肉的消费习惯以及畜牧业的做法。此外，还采访了所有结核菌素试验牛的牧场主，以了解结核菌素阳性牛的可能危险因素。收集了动物个体的年龄和性别、畜群规模、来源、品种类型、最近引进的新动物以及不同牲畜的饲养情况等数据。对牛接种卡介苗的历史有记载。

在取得知情同意后，由经过培训的实验室技术人员和病理学家分别采集疑似PTB患者的痰液(现场和早晨)和疑似EPTB患者的细针抽吸(FNA)样本。

首先将样品消化和氢氧化物N-乙酰基L-半胱氨酸钠（NALC-NaOH）的方法浓缩/净化。从各种试样的最终沉积物的涂片由抗酸（ZN）方法染色并使用双目光学显微镜下油浸检查。所有涂片阳性肺结核样品保存于+ 4℃，在研究的网站，然后直至进行细菌培养输送到区域卫生研究检测中心（Bahirdar），并保持在+ 4℃。

类似地，FNA标本进行病理学家收集并用pH 7.2的保存在冷冻管在磷酸盐缓冲盐水（PBS）。进行ZN染色。AFB阳性标本保存在-20℃下直至进行分枝杆菌培养物。

将样品处理用于培养根据标准方法前面描述[ 11, 12]。痰和FNA样本都在Bahir Dar区域卫生研究实验室中心培养。

为了区分 结核分枝杆菌从其他成员 结核分枝杆菌复合物（MTBC）物种，基于RD9-PCR根据先前描述的方案执行的处理 13]。此外spoligotyping和 结核分枝杆菌药抗药性（MTBDR 加用分子试验进行鉴别 结核分枝杆菌从分枝杆菌的其他成员。 结核分枝杆菌H37Rv, 牛分枝杆菌作为阳性对照和水被用作阴性对照卡介苗（BCG）都包括在内。结果的解释是基于不同的尺寸（396碱基对（bp），用于带 结核分枝杆菌and 375 bp for 牛分枝杆菌)如上文所述[ 14]。

用于在牛中检测TB进行单次皮内比较结核菌素试验（SIDCTT）。SICTT被同时使用牛和鸟类纯化的蛋白质衍生物（PPD的）（Prionics公司莱利斯塔德B. V.，荷兰）进行。结核菌素试验测量在皮肤上的过敏反应由于所施用的抗原（PPD的）。

在颈部的中间切除两个部位，一个在另一个之上，相距约12厘米，用于注射两种ppd。注射前用卡尺测量并记录注射部位皮肤褶皱的厚度。在这些部位皮下注射0.1 ml (2000IU)牛PPD和0.1 ml (2500IU)禽PPD。72h后测量两个位点的皮肤厚度变化，根据国际标准[ 15]和当地[ 16]的标准。

从亚的斯亚贝巴大学的道德委员会，自然学院与计算科学（参考CNSDO / 491/07/15），得到了该研究的伦理关。此外，书面许可，从阿姆哈拉地区卫生局研究伦理委员会要求（参考HRTT /271分之1/ 07）。每个研究参与者同意以书面形式，并同意的研究目标和患者数据机密性明确的解释后，参加学习。In case of participants under the age of 18 years, consent was obtained from their parents/guardians. The animals used in this study were privately owned by the study participants, and a written consent was sought from the owners to take samples from the animals. A high standard veterinary care was taken to minimize cattle suffering during tuberculin test.

在的活性的TB病例59.7％（186分之111），得到培养阳性。其中，59.5％（111分之66）从EPTB患者中分离。使用基于RD9-PCR培养阳性菌株的分子分型发现，所有分离株完整RD9轨迹和随后列为 结核分枝杆菌。没有 牛分枝杆菌检测（图 1)。此外，spoligotype和抗结核药物的分子敏感性试验也证实，所有来自人类结核患者的分枝杆菌分离株均为结核分枝杆菌 结核分枝杆菌（数据未显示）。

约68%(74/111)的受访者不知道结核病从牛到人的传播，或反之亦然。约69%(77/111)受访者有饮用生奶及其他未煮熟的奶类制品的习惯(表) 1)。

Logistic回归，以约动物传播的结果变量，导致病人出身，教育状况的认识数赔率观察被显著相关（ p < 0.05 ）（表 1)。The study participants in Libo kemkem and Simada were 11 and 10 times more aware about the zoonotic tramnsmission of TB as compared to those of Dera District (Libo kemkem vs. Dera AOR = 11.84; 95% CI: 1.67–73.2; p = 0.003 )and (Simada vs. Dera AOR = 10.47; 95% CI: 0.72–116.3; p = 0.038 )。The odds of having awareness on zoonotic transmission of TB was higher among individuals with secondary school educational level (AOR = 4.16; 95% CI: 1.05–15.57; p = 0.029 )，与文盲相比 1)。

然而,其他病人特征如年龄、性别、家庭中结核病的历史,原料奶消费习惯,和病人类别(新的或再处理的情况下)没有显著相关、对人畜共患结核病的传播的所有awarness(表 1)。

大多数牛是女性占研究牛的54.2％（476分之258）。Cattle within the age range of 5–10 years had the greatest share (47%) from the total cattle tested with a mean age of 5.5 years. Many of the cattle, 447 (94%), were Zebu breed, while only 29 (6%) of them were cross breed (Table 2)。所有研究牛之前都没有接种过卡介苗。

在结核病阳性和无结核病家庭中，≥2 mm截断值的动物患病率分别为1.6%(5/315)和1.2%(2/161)。用同样的临界值，结核病阳性家庭和无结核病家庭的牛群患病率分别为7.9%(5/63)和6.3%(2/32)。动物和牧群总体患病率分别为1.5%(7/476)和7.4%(7/95)。然而，在国际截断值>4毫米时，所有被检测的牛均未出现牛结核病阳性。

Risk factor analysis to the occurrence of bovine TB in cattle revealed that age groups between 5 and 10 years were more reactive, but not statistically significant ( P > 0.05 ),to tuberculin test than younger age groups (AOR = 3.1; 95% CI: 0.35–35.69; p = 0.16 )。Cattle with apparently good (AOR = 8.53; 95% CI: 0.85–83.34; p = 0.02 )and medium (AOR = 3.00; 95% CI: 0.27–28.38; p = 0.33 )与身体状况明显较差的人相比，身体状况更容易对结核菌素测试产生反应，且差异具有统计学意义( p < 0.05 ）（表 2)。虽然差异无统计学显著（ p > 0.05 ),the odds of bovine TB that cattle owned by TB positive cases were slightly higher than those owned by TB free households (AOR = 1.39; 95% CI: 0.31–7.10; p = 0.76 )。尽管存在观察到的差异，但性别、品种类型、牛的来源和家庭结核病状况并没有显著相关( p > 0.05 ）与BTB的在本研究中的发生（表 2)。

在本研究中，利用基于rd9的PCR对培养阳性分离株进行分子分型，证实所有人分离株均为 结核分枝杆菌(图 1)。此外，没有 牛分枝杆菌甚至在拥有结核菌素反应器牛的结核病患者身上也发现了结核菌素。因此，这项研究并没有显示结核病从牛直接传播到与其密切相关的主人的证据。