1。目的
幽门螺杆菌 （
幽门螺旋杆菌 )是一种螺旋形细菌，主要见于胃内
1 ]。这种细菌在胃炎显著致病作用，胃癌，胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和消化性溃疡病[
2 ]。世界卫生组织进行分类
幽门螺旋杆菌 作为第一类致癌物[
3 ]。这是一个大问题，因为世界人口的大约一半被感染
幽门螺旋杆菌 [
4 ]。
目前，有可用于识别重重考验
幽门螺旋杆菌 ，但没有金标准。快速尿素酶试验（RUT）被广泛应用于临床检测的脲酶
幽门螺旋杆菌 胃粘膜活检。脲酶酶水解尿素成二氧化碳和氨允许
幽门螺旋杆菌 在酸性介质中的生存[
2 ，
五 ]。人们普遍认为，酸还原的药物，特别是质子泵抑制剂（PPI），通过减少的量降低RUT，尿素呼吸试验，组织学，和粪便抗原检测的灵敏度和准确度
幽门螺旋杆菌 [
6 ，
7 ]。
质子泵抑制剂降低的活性
幽门螺旋杆菌 在胃中和近侧移位它们的分布。所以建议质子泵抑制剂抑制其生长
幽门螺旋杆菌 通过pH依赖性机制。质子泵抑制剂可以在诊断试验导致假阴性和执行测试[之前应停止至少2-4周
8 ，
9 ]。然而，由于PPI撤退是强烈症状复发有关这会产生一个问题。而在PPI，负RUT不足以排除感染。活检标本可能含有活细胞的低细菌密度，得到了否定的结果。这将成为一个问题，因为很多美国人正在服用这些药物。2009年，生产者价格指数在美国的销售和第六，对处方的总数分配排在第三位[
10 ]。在一些研究中，作者得出结论，质子泵抑制剂减少车辙和组织学检查胃窦和胃体活检的敏感性和特异性。聚合酶链反应（PCR）是在检测更灵敏
幽门螺旋杆菌 。Yakoob等。结果表明，PCR比患者服用质子泵抑制剂[RUT和组织学更敏感
7 ，
11 ，
12 ]。然而，单基因PCR的问题仍然达不到理想的特异性和误报。有了问题，酸，减少药物引起的许多诊断测试
幽门螺旋杆菌 ，DNA，和当前的PCR方法测试对于1个或2个基因的突变率，我们开发了一种独特的多重PCR（M-PCR）检测5个独特的基因，提高了特异性。
在先前的研究中，我们进行了，我们独特的M-PCR准确地识别
幽门螺旋杆菌 相比RUT和免疫组织化学分析;除了标识的显著数
幽门螺旋杆菌 这将不是由前者方法[被检测感染
13 -
15 ]。本研究的目的是确定质子泵抑制剂对RUT和M-PCR的结果的影响。我们推测，M-PCR将不会受到从质子泵抑制剂的生理变化而受到影响，由于M-PCR技术和DNA的稳定性的灵敏度。
3.结果
总共556米的样品均具有超过在其中所收集的数据的时间间隔超过一个测试一些病人。一个postclinical备案审查指出，有地方人服用PPI内镜检查之前至少四周282（50.7％）的情况下。
有由M-PCR测试了两组之间没有差异。通过M-PCR检测，
幽门螺旋杆菌 在对照组274例中有143例(52.2%)，在282例接受PPI治疗的患者中有130例(46.1%)(
P
=
0.1746
)。CLOtest检测到…的存在
幽门螺旋杆菌 在来自相同组的组不服用PPI接收274例治疗PPI和29（10.6％）282案件4（1.4％）（
P
≤
0.0001
)。该M-PCR鉴定
幽门螺旋杆菌 在从CLOtest的34例33（97.1％）（表
1 )。
表格1
M-PCR和CLOtest的区别。
在PPI
如果没有PPI
P 价值
ñ
=
282
CLOtest的
Positive
4（1.4）
29 (10.6)
<0.0001
Negative
278（98.6）
245（89.4）
M-PCR
Positive
130（46.1）
143（52.2）
0.1746
Negative
152（53.9）
131 (47.8)
在这两种PPI和无PPI组，有一个在CLOtest的和M-PCR之间检测率显著差异（
P
≤
0.0001
)。的523箱子附加241（46.1％）是由M-PCR那名CLOtest的负检测。具体地，PPI组中，检测到127附加箱子出的278（45.7％）和114出来的245（46.5％），对照组中检测到。
4。结论
幽门螺旋杆菌 被称为是主要的人类病原体。因为不同的影响的
幽门螺旋杆菌 ，需要一种准确的检测方法。目前，还没有一种方法足够灵敏和特异，可以被认为是“金标准”，所以我们不能使用一种标准进行比较;但使用的是在实践中普遍使用的，并被证明具有临床意义。我们开发了一种独特的多重PCR检测方法
幽门螺旋杆菌 在内镜活检标本。
这项研究表明，生产者价格指数影响
幽门螺旋杆菌 通过CLOtest的方法检测率，但不是M-PCR。这主要是考虑当选择一个诊断测试来检测的重要因素
幽门螺旋杆菌 。此外，结果被重新测试由CLOtest的负面结果表明额外的46.1％，阳性病例。因此，
幽门螺旋杆菌 通过电流检测方法应仔细检查，特别是谁最近一直在服用质子泵抑制剂患者，以确保结果不是假阴性。的CLOtest的是高度特异性的，但需要的细菌检测的高密度。所述M-PCR是敏感足以检测的存在
幽门螺旋杆菌 尽管一个人正在对PPI治疗。
在我们的研究中，M-PCR的高检出率可以归因于我们研究的患者群。我们只测试了有症状的患者，这是更有可能的感染;作为结果的数字将在这些类型的患者高。用于在检测率和低的检测率在RUT组之间的差异的另一种来源是来自的的圆球形式形成
幽门螺旋杆菌 。它可分为三个阶段:螺旋状、可活的球状体和退行性不可活的球状体。各种条件都可能诱发球虫形态，如PPI和某些抗生素[
17 ]。有研究表明，蛋白质含量和遗传物质从螺旋到圆球形式在转换过程中保持不变。的圆球细胞的脲酶活性比螺旋形式下[
18 ]。通过车辙鉴定球虫是困难的;然而，PCR方法被用来检测遗传物质，因为DNA保持完整。Can等的研究表明，由于未检测到突变，尿素基因区域的可靠性是由不同因素引起的[
19 ]。之前的研究表明，我们的M-PCR能够检测到coccoid形式的DNA。球虫形态的毒性较弱，不易形成定植和诱发炎症。然而，它可能在感染中起作用，并被怀疑是抗菌治疗后感染复发的部分原因。当条件合适时，球虫形态可以恢复为螺旋形态，并可能恢复传染性[
18 ]。
我们不排除提到的那些以外的其他药物。任何药物增加pH或抗生素可以影响生长
幽门螺旋杆菌 从而可能影响结果。一个病人被CLOtest的测试呈阳性，而由M-PCR阴性。这可能有几个方面的原因差异;它可能是一个假阳性，其中CLOtest的是97％特异性或其中一个不同的脲酶生成酶的细菌或M-PCR未能检测到的细菌由于基因突变。在我们以前的研究中，所有的阳性患者免疫组化分析和CLOtest的人还通过胃标本[的M-PCR方法阳性
13 ]。
46.1％和52.2％，我们正M-PCR结果，PPI组和对照组，分别是类似于我们以前的研究，检测的病例52％，
幽门螺旋杆菌 和另外的40％从阴性结果。我们进行了一项双盲研究，相关的M-PCR的检测率炎症评分，免疫组化结果，并CLOtest的结果。该M-PCR和CLOtest的结果不是由一个独立病理学家谁检查的组织学特征闻名。该研究的结论是，在胃活检标本的平均活性和慢性炎症分数在PCR阳性比PCR阴性显著越大，表示存在
幽门螺旋杆菌 。在胃活检标本中，M-PCR检测到的
幽门螺旋杆菌 在所有的阳性病例检测通过免疫组织化学分析和/或CLOtest的[
13 ]。
这项研究的结果和结论与那些由Yakoob等进行了一项先前的研究相一致。研究发现在检测率没有差异通过PCR，这是在PPI的组和对照组，74％和在胃窦75％之间。它也得出结论，既RUT和组织学的诊断率降低和PCR比两者更为敏感。在从胃窦活检的PPI组，在PCR 74％，在RUT 18％，并且在组织学50％阳性。此外，PPI组中附加68％，对照44％被发现通过PCR阳性。PCR的检测率较高相比，我们的研究，这可能是由于较小的研究人群，种族背景，或患者病情加重。此外，检出率会因他们的研究中使用的一个基因与使用5个基因研究我们其实更高。该研究的结论是，使用的酸降低药物相比，PCR和组织学[降低RUT的诊断率
11 ]。在大多数涉及传统的PCR其他研究中，一个或两个基因进行鉴定
幽门螺旋杆菌 。从因为我们的M-PCR所有其他研究我们的M-PCR不同使用5个基因，因此是更具体的
幽门螺旋杆菌 。因此，它可能很难对我们的M-PCR的结果关联到传统的PCR。
检测微生物的使用PCR技术，包括
幽门螺旋杆菌 ，是有据可查的。与传统的PCR方法潜在的问题包括假阳性由于各种物种间污染和同源DNA序列。在我们的研究中，有非PPI组中的M-PCR和CLOtest的差别大，可能代表误报[
20 ]。用于M-PCR的引物在国家生物技术信息中心的基因库中被扫描，没有找到匹配的。还有M-PCR
幽门螺旋杆菌 物对19种细菌测试（
大肠杆菌，产气肠杆菌，阴沟肠杆菌，肠球菌 种类，
Viridians 组，
铜绿假单胞菌，沙雷 种类，
肺炎克雷伯菌，MRSA，乳酸菌 种类，
枸橼酸 种类，
脆弱拟杆菌（ATCC25285），Wolinella succinogenes的（ATCC29543），空肠弯曲菌（ATCC33291），幽门螺旋鸡白痢（ATCC52802），幽门螺旋fennelliae（ATCC35683），螺杆菌 种类
（ATCC35683），幽门螺旋海尔曼螺杆菌（ATCC49286），和幽门螺杆菌蚤（ATCC49179 ））。19种菌均未发现标准
幽门螺旋杆菌 M-PCR条带图案。还有一个内部控制，以防止误报。我们的M-PCR放大在同一时间10个的DNA片段以及将针对每个5个基因座的产生两个片段，一个内部到另一个。我们的一步法多巢式PCR的内部控制是用来排除在引物结合位点的各种物种间引起同源DNA序列的假阳性，使得比传统的PCR的M-PCR更加具体。此外，如前所述，我们的M-PCR试验，通过我们的研究证实，表明我们正M-PCR检测结果显示显著更大的平均活动和慢性炎症分数。
车辙非PPI组的检出率在研究中低。这可能归因于我们不排除像铋化合物或钙产品其他酸降低药物。虽然我们通过全面的药物审查和调查去了，患者可能没有充分披露信息。我们的检出率较其他研究低，但其他研究提到已经取得了低利率以及[
11 ，
12 ]。
总的来说，M-PCR检测了241例阳性病例。如果病人的车辙呈阴性，我们的M-PCR已经证明在诊断中是有用的
幽门螺旋杆菌 进一步评估否定的结果，因为它不会受到酸降低药物。使用M-PCR的可推荐作为添加剂测试，以确认存在
幽门螺旋杆菌 患者负成规。此外，对于谁需要他们的病人上经验性治疗或维持治疗医生，可以使用M-PCR检测，以便不需要患者将采取关闭一个PPI。此M-PCR测定法鉴定的显著数
幽门螺旋杆菌 会不会被RUT进行检测，发现另外46.1％阳性病例的感染。我们的M-PCR检测
幽门螺旋杆菌 将提高检出率，增加机会，医疗干预，并允许通过未受到PPI与许多其他诊断方法敏感，特异的方法进行治疗的患者。我们开发了一个可用的M-PCR在美国可供医生使用。